*Centro de Bachillerato Tecnológico
Industrial y de Servicios No. 155*
Profr.:
Alfaro López Víctor Manuel
Asignatura:
Procesar Cultivos Bacteriológicos
Practica:
No. 3; Medios de Cultivo: Caldo de Tetrationato y
Caldo Nutritivo.
Mesa:
3
Grupo:
4L2M
Integrantes:
Águila Cabrera Oscar Uriel
Esparza Quiroz Brenda Lucila
Flores Hernández Cynthia Giselle
Huerta Álvarez Tania Sarahi
Montes Gutiérrez Kimberly
Ramírez Barragán Berenice
*Centro de Bachillerato Tecnológico
Industrial y de Servicios No. 155*
Profr.:
Alfaro López Víctor Manuel
Asignatura:
Procesar Cultivos Bacteriológicos
Practica:
No.4; Medios de Cultivo: Agar Mac Conkey
Mesa:
3
Grupo:
4L2M
Integrantes:
Águila Cabrera Oscar Uriel
Esparza Quiroz Brenda Lucila
Flores Hernández Cynthia Giselle
Huerta Álvarez Tania Sarahi
Montes Gutiérrez Kimberly
Ramírez Barragán Berenice
*Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo MAC CONKEY:
Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada [como apoyo] dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en cajas petri, siendo un total de 18 cajas petri por mesa.
Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el vaso de precipitado (360ml).
Para poder mezclar y que no queden gránulos
O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua.
Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo.
Después del repaso del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras.
Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, se cubre con cinta masking tape, se etiqueta con registros del medio de cultivo, numero de masa, fecha y hora de elaboración.
Todos los integrantes se pondrán de acuerdo para el proceso de esterilización y se depositaran en la autoclave: que ya previamente prepararon desde el inicio de la práctica.
Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo “Caldo de Tetrationato”
Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada, dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en tubos de ensaye, siendo un total de 6 tubos por mesa.
Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el matraz erlenmeyer.
Para poder mezclar y que no queden gránulos
O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua.
Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo.
Después del repaso del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras.
Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, NO se esteriliza y se deja reposando hasta que estén ya esterilizados los tubos de ensaye, para vaciar el medio. Ya listos los tubos se vacía el medio en cada uno de ellos (10ml cada uno) ya terminado el vaciado se tamponean con torundas de algodón, se etiquetan y se entregan al maestro.
Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo “Caldo Nutritivo”
Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada (60ml), [dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en tubos de ensaye], siendo un total de 6 tubos por mesa.
Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el matraz erlenmeyer.
Para poder mezclar y que no queden gránulos
O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua.
Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo.
Después del reposo del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras.
Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, se cubre con cinta masking tape, se etiqueta con registros del medio de cultivo, numero de masa, fecha y hora de elaboración.
Todos los integrantes se pondrán de acuerdo para el proceso de esterilización y se depositaran en la autoclave. Una vez ya esterilizado, se deja enfriar y se vacía en tubos de ensaye No estériles, se tamponea, se etiquetan y se entregan al maestro.
**Técnica de esterilización de la autoclave [por calor húmedo]
Se esterilizara el producto a 15 libras de presión y una temperatura de 120*C durante 20 min. Una ves terminada la esterilización se deja enfriar el producto, se libera del autoclave, se entrega a las mesas se llevara a cabo el vaciado en cajas preti.
Para el vaciado en cajas petri, se requiere de un campo de esterilización en la mesa con 2 mecheros para que el producto este en el centro de la mesa dentro del campo de esterilización.
miércoles, 28 de abril de 2010
*Centro de Bachillerato Tecnológico
Industrial y de Servicios No. 155*
Profr.:
Alfaro López Víctor Manuel
Asignatura:
Procesar Cultivos Bacteriológicos
Practica:
No. 3; Medios de Cultivo: Caldo de Tetrationato y
Caldo Nutritivo.
Mesa:
3
Grupo:
4L2M
Integrantes:
Águila Cabrera Oscar Uriel
Esparza Quiroz Brenda Lucila
Flores Hernández Cynthia Giselle
Huerta Álvarez Tania Sarahi
Montes Gutiérrez Kimberly
Ramírez Barragán Berenice
*Centro de Bachillerato Tecnológico
Industrial y de Servicios No. 155*
Profr.:
Alfaro López Víctor Manuel
Asignatura:
Procesar Cultivos Bacteriológicos
Practica:
No.4; Medios de Cultivo: Agar Mac Conkey
Mesa:
3
Grupo:
4L2M
Integrantes:
Águila Cabrera Oscar Uriel
Esparza Quiroz Brenda Lucila
Flores Hernández Cynthia Giselle
Huerta Álvarez Tania Sarahi
Montes Gutiérrez Kimberly
Ramírez Barragán Berenice
*Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo MAC CONKEY:
Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada [como apoyo] dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en cajas petri, siendo un total de 18 cajas petri por mesa.
Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el vaso de precipitado (360ml).
Para poder mezclar y que no queden gránulos
O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua.
Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo.
Después del repaso del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras.
Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, se cubre con cinta masking tape, se etiqueta con registros del medio de cultivo, numero de masa, fecha y hora de elaboración.
Todos los integrantes se pondrán de acuerdo para el proceso de esterilización y se depositaran en la autoclave: que ya previamente prepararon desde el inicio de la práctica.
Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo “Caldo de Tetrationato”
Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada, dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en tubos de ensaye, siendo un total de 6 tubos por mesa.
Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el matraz erlenmeyer.
Para poder mezclar y que no queden gránulos
O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua.
Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo.
Después del repaso del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras.
Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, NO se esteriliza y se deja reposando hasta que estén ya esterilizados los tubos de ensaye, para vaciar el medio. Ya listos los tubos se vacía el medio en cada uno de ellos (10ml cada uno) ya terminado el vaciado se tamponean con torundas de algodón, se etiquetan y se entregan al maestro.
Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo “Caldo Nutritivo”
Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada (60ml), [dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en tubos de ensaye], siendo un total de 6 tubos por mesa.
Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el matraz erlenmeyer.
Para poder mezclar y que no queden gránulos
O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua.
Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo.
Después del reposo del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras.
Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, se cubre con cinta masking tape, se etiqueta con registros del medio de cultivo, numero de masa, fecha y hora de elaboración.
Todos los integrantes se pondrán de acuerdo para el proceso de esterilización y se depositaran en la autoclave. Una vez ya esterilizado, se deja enfriar y se vacía en tubos de ensaye No estériles, se tamponea, se etiquetan y se entregan al maestro.
**Técnica de esterilización de la autoclave [por calor húmedo]
Se esterilizara el producto a 15 libras de presión y una temperatura de 120*C durante 20 min. Una ves terminada la esterilización se deja enfriar el producto, se libera del autoclave, se entrega a las mesas se llevara a cabo el vaciado en cajas preti.
Para el vaciado en cajas petri, se requiere de un campo de esterilización en la mesa con 2 mecheros para que el producto este en el centro de la mesa dentro del campo de esterilización.
Industrial y de Servicios No. 155*
Profr.:
Alfaro López Víctor Manuel
Asignatura:
Procesar Cultivos Bacteriológicos
Practica:
No. 3; Medios de Cultivo: Caldo de Tetrationato y
Caldo Nutritivo.
Mesa:
3
Grupo:
4L2M
Integrantes:
Águila Cabrera Oscar Uriel
Esparza Quiroz Brenda Lucila
Flores Hernández Cynthia Giselle
Huerta Álvarez Tania Sarahi
Montes Gutiérrez Kimberly
Ramírez Barragán Berenice
*Centro de Bachillerato Tecnológico
Industrial y de Servicios No. 155*
Profr.:
Alfaro López Víctor Manuel
Asignatura:
Procesar Cultivos Bacteriológicos
Practica:
No.4; Medios de Cultivo: Agar Mac Conkey
Mesa:
3
Grupo:
4L2M
Integrantes:
Águila Cabrera Oscar Uriel
Esparza Quiroz Brenda Lucila
Flores Hernández Cynthia Giselle
Huerta Álvarez Tania Sarahi
Montes Gutiérrez Kimberly
Ramírez Barragán Berenice
*Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo MAC CONKEY:
Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada [como apoyo] dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en cajas petri, siendo un total de 18 cajas petri por mesa.
Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el vaso de precipitado (360ml).
Para poder mezclar y que no queden gránulos
O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua.
Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo.
Después del repaso del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras.
Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, se cubre con cinta masking tape, se etiqueta con registros del medio de cultivo, numero de masa, fecha y hora de elaboración.
Todos los integrantes se pondrán de acuerdo para el proceso de esterilización y se depositaran en la autoclave: que ya previamente prepararon desde el inicio de la práctica.
Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo “Caldo de Tetrationato”
Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada, dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en tubos de ensaye, siendo un total de 6 tubos por mesa.
Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el matraz erlenmeyer.
Para poder mezclar y que no queden gránulos
O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua.
Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo.
Después del repaso del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras.
Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, NO se esteriliza y se deja reposando hasta que estén ya esterilizados los tubos de ensaye, para vaciar el medio. Ya listos los tubos se vacía el medio en cada uno de ellos (10ml cada uno) ya terminado el vaciado se tamponean con torundas de algodón, se etiquetan y se entregan al maestro.
Indicaciones para desarrollo del medio de cultivo “Caldo Nutritivo”
Pesar el polvo de medio de cultivo utilizando vidrio de reloj, realizando regla de tres, solicitar al laboratorio agua destilada (60ml), [dependiendo de la cantidad de producto que se valla a ocupar en tubos de ensaye], siendo un total de 6 tubos por mesa.
Una vez pesado el polvo del medio de cultivo se mezclan en el contenido de agua que se tiene en el matraz erlenmeyer.
Para poder mezclar y que no queden gránulos
O grumos se utiliza la varilla de cristal para agitar conforme a las manecillas del reloj hasta que se disuelva el polvo en el agua.
Una vez que ya tenemos la mezcla hecha dejamos reposar el producto de acuerdo a las indicaciones que contiene el depósito del medio de cultivo.
Después del reposo del producto se le da movimientos en rotación a juego de muñeca exponiéndolo al fuego del mechero, estos movimientos y exposición darán como resultado la ebullición [hervor] y se le dará desde el momento que inicia la ebullición un minuto de tiempo para que quede listo nuestro medio de cultivo en forma liquida.
Se debe tener cuidad con la ebullición del producto en el matraz erlenmeyer ya que este puede rebasar los limites y ocasionar accidente por quemaduras.
Una ves terminado el proceso de ebullición del medio de cultivo se deja enfriar, se tamponea [se tapa] con torundas de algodón, se cubre con cinta masking tape, se etiqueta con registros del medio de cultivo, numero de masa, fecha y hora de elaboración.
Todos los integrantes se pondrán de acuerdo para el proceso de esterilización y se depositaran en la autoclave. Una vez ya esterilizado, se deja enfriar y se vacía en tubos de ensaye No estériles, se tamponea, se etiquetan y se entregan al maestro.
**Técnica de esterilización de la autoclave [por calor húmedo]
Se esterilizara el producto a 15 libras de presión y una temperatura de 120*C durante 20 min. Una ves terminada la esterilización se deja enfriar el producto, se libera del autoclave, se entrega a las mesas se llevara a cabo el vaciado en cajas preti.
Para el vaciado en cajas petri, se requiere de un campo de esterilización en la mesa con 2 mecheros para que el producto este en el centro de la mesa dentro del campo de esterilización.
lunes, 26 de abril de 2010
Practicas
Introducción
Esta práctica sirve para realizar uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el medio de cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el cultivo. Las pruebas bioquímicas consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, nos permiten identificar distintos microorganismos presentes. Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una vía metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no. Para realizar las pruebas bioquímicas se dispone de múltiples medios, los cuales se deben aplicar de acuerdo a las exigencias del microorganismo en estudio. De la amplia variedad de pruebas bioquímicas, nosotros en laboratorio utilizaremos 10, aplicados a 5 especies de microorganismos. Además estudiaremos los resultados que estos test arrojan, comparando resultados experimentales entre los distintos grupos de trabajo de nuestro laboratorio
Objetivo
Nuestro objetivo como equipo es realizar un medio de caldo de tetranionato utilizando tubos de ensaye experimentando o realizar pruebas febriles no solo hicimos de ese medio si no también de agar nutritivo pero realmente eso medios son para pruebas febriles esos medios son para el crecimiento de enterobacterias y para la salmonella y shigella.
Materiales de cristaleria :
• Vidrio de reloj
• Matraz Erlenmeyer
• Agitador de cristal
• vaso de precipitado
materiales :
• Valanza granataria
• espatula
• guante
• mecheros
• gas lp
• encendedor
• maskin tape
• autoclave
• h2o destilada
• esterilizadora de calor seco
• papel secante
• papel blanco
• caja petric
reactivo:
½ de cultivo
Concluciones:
Está parctica nos ayuda a saver como hacer ½ de cultivo para pruebas bioquimicas ( copro cultivo ) y saver desarrollar nuestro intelecto .
Introducción
Solución que cuenta con los nutrientes necesarios para recuperar, multiplicar, aislar e identificar los microorganismos (bajo condiciones favorables de temperatura y pH), así como efectuar pruebas de susceptibilidad. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados, al prepararse podemos encontrarlos en estado sólido, semisólido y líquido. Este medio es un Medio diferencial para la detección, aislamiento y enumeración de bacterias coliformes y patógenos intestinales en aguas, productos lácteos y muestras biológicas.
Objetivo
En esta práctica realizamos el medio de Mac Conkey para 18 cajas este medio es para el crecimiento de enterobacterias del grupo mycobacterium en especial ese grupo es para repartir cada caja para cada integrante de las 6 mesas y tanto como ellos elaboraron medios para repartirlos como nosotros lo hicimos.
Medios selectivos
• Agar SS (salmonella-shigella). Este medio selectivo, empleado para aislar Salmonella y Shigella ejerce una buena inhibición sobre agentes coliformes, sin limitar el desarrollo de los patógenos gramnegativos. Se utiliza especialmente junto al agar-sulfito de bismuto, para siembra de materiales provenientes de medios enriquecedores, como caldo tetrationato y caldo con selenito. Contiene sales biliares, lactosa, citrato y tiosulfato sódico, citrato férrico, verde brillante y rojo neutro como indicador. Shigella y Salmonella, como también otros agentes que no fermentan la lactosa, aparecen como colonias lisas, transparentes a opacas; las pocas colonias fermentadoras de la lactosa que se pueden desarrollar tienen color rojo y un centro negro. Conviene señalar que la bilis o las sales biliares inhiben el crecimiento de microorganismos grampositivos y esporulados sin interferir en el crecimiento de los bacilos gramnegativos.
• Agar MacConkey. Es un medio selectivo-diferencial que contiene sales biliares, las cuales inhiben la flora grampositiva. Los agentes del grupo coliforme dan colonias de color rojo, debido a que fermentan la lactosa. En cambio, Salmonella y Shigella sp. forman colonias incoloras.
• Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato). Medio indefinido, mixto, sólido y diferencial. En él crecerán microorganismos quimioheterótrofos formadores de sulfhídrico a partir de sulfato. En la receta aparece rojo fenol, en el cual actúa el indicador de pH.
Nombres de las bacterias:
BACTERIA:
Salmonella, Shigella y Campylobacter: pueden provocar infección en el intestino.
Campylobacter
Campylobacter coli
Escherichia col
iEscherichia coli-
Escherichia coliras
Escherichia coli
Salmonella Invasi.
Shigella dysenteriae
Shigella
Vidrio cholerae
Vidrio parahaemolyticus
Yersinia enterocolitica
Staphylococus aureus
Plesiomonas shigelloides
Aeromonas spp
Bacillus cereus
Diarrea
Clostridium difficile
Clostridium perfringens
Esta práctica sirve para realizar uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el medio de cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el cultivo. Las pruebas bioquímicas consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, nos permiten identificar distintos microorganismos presentes. Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una vía metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no. Para realizar las pruebas bioquímicas se dispone de múltiples medios, los cuales se deben aplicar de acuerdo a las exigencias del microorganismo en estudio. De la amplia variedad de pruebas bioquímicas, nosotros en laboratorio utilizaremos 10, aplicados a 5 especies de microorganismos. Además estudiaremos los resultados que estos test arrojan, comparando resultados experimentales entre los distintos grupos de trabajo de nuestro laboratorio
Objetivo
Nuestro objetivo como equipo es realizar un medio de caldo de tetranionato utilizando tubos de ensaye experimentando o realizar pruebas febriles no solo hicimos de ese medio si no también de agar nutritivo pero realmente eso medios son para pruebas febriles esos medios son para el crecimiento de enterobacterias y para la salmonella y shigella.
Materiales de cristaleria :
• Vidrio de reloj
• Matraz Erlenmeyer
• Agitador de cristal
• vaso de precipitado
materiales :
• Valanza granataria
• espatula
• guante
• mecheros
• gas lp
• encendedor
• maskin tape
• autoclave
• h2o destilada
• esterilizadora de calor seco
• papel secante
• papel blanco
• caja petric
reactivo:
½ de cultivo
Concluciones:
Está parctica nos ayuda a saver como hacer ½ de cultivo para pruebas bioquimicas ( copro cultivo ) y saver desarrollar nuestro intelecto .
Introducción
Solución que cuenta con los nutrientes necesarios para recuperar, multiplicar, aislar e identificar los microorganismos (bajo condiciones favorables de temperatura y pH), así como efectuar pruebas de susceptibilidad. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados, al prepararse podemos encontrarlos en estado sólido, semisólido y líquido. Este medio es un Medio diferencial para la detección, aislamiento y enumeración de bacterias coliformes y patógenos intestinales en aguas, productos lácteos y muestras biológicas.
Objetivo
En esta práctica realizamos el medio de Mac Conkey para 18 cajas este medio es para el crecimiento de enterobacterias del grupo mycobacterium en especial ese grupo es para repartir cada caja para cada integrante de las 6 mesas y tanto como ellos elaboraron medios para repartirlos como nosotros lo hicimos.
Medios selectivos
• Agar SS (salmonella-shigella). Este medio selectivo, empleado para aislar Salmonella y Shigella ejerce una buena inhibición sobre agentes coliformes, sin limitar el desarrollo de los patógenos gramnegativos. Se utiliza especialmente junto al agar-sulfito de bismuto, para siembra de materiales provenientes de medios enriquecedores, como caldo tetrationato y caldo con selenito. Contiene sales biliares, lactosa, citrato y tiosulfato sódico, citrato férrico, verde brillante y rojo neutro como indicador. Shigella y Salmonella, como también otros agentes que no fermentan la lactosa, aparecen como colonias lisas, transparentes a opacas; las pocas colonias fermentadoras de la lactosa que se pueden desarrollar tienen color rojo y un centro negro. Conviene señalar que la bilis o las sales biliares inhiben el crecimiento de microorganismos grampositivos y esporulados sin interferir en el crecimiento de los bacilos gramnegativos.
• Agar MacConkey. Es un medio selectivo-diferencial que contiene sales biliares, las cuales inhiben la flora grampositiva. Los agentes del grupo coliforme dan colonias de color rojo, debido a que fermentan la lactosa. En cambio, Salmonella y Shigella sp. forman colonias incoloras.
• Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato). Medio indefinido, mixto, sólido y diferencial. En él crecerán microorganismos quimioheterótrofos formadores de sulfhídrico a partir de sulfato. En la receta aparece rojo fenol, en el cual actúa el indicador de pH.
Nombres de las bacterias:
BACTERIA:
Salmonella, Shigella y Campylobacter: pueden provocar infección en el intestino.
Campylobacter
Campylobacter coli
Escherichia col
iEscherichia coli-
Escherichia coliras
Escherichia coli
Salmonella Invasi.
Shigella dysenteriae
Shigella
Vidrio cholerae
Vidrio parahaemolyticus
Yersinia enterocolitica
Staphylococus aureus
Plesiomonas shigelloides
Aeromonas spp
Bacillus cereus
Diarrea
Clostridium difficile
Clostridium perfringens
lunes, 22 de marzo de 2010
Tarea 3
*CBTIS 155*
Tinciones Diferenciales
INTEGRANTES:
Águila Cabrera Oscar Uriel
Esparza Quiroz Brenda Lucila
Flores Hernández Cynthia Giselle
Huerta Álvarez Thania Sarahi
Montes Gutiérrez Kimberley
Ramírez Barragán Brenda Berenice
MATERIA: Procesar Cultivos Bacteriológicos
PROFESOR: Víctor Manuel Alfaro López
MESA: 3
Grupo: 4L2M
Tinciones Diferenciales
Tincion De Gram
Antecedentes de la Tinción de Gram
La Tinción De Gram. Fue desarrollada empíricamente por Christian Gram en 1884, a pesar del tiempo transcurrido la tinción apenas se ha modificado y es uno de los primeros pasos que se realiza para cualquier identificación bacteriana.
La técnica es capaz de diferenciar dos grandes grupos de bacterias Gram Positivas y gram Negativas.
Fundamentos de la tinción de Gram.
Resultados De La Coloración
| Gram Positivas | Gram Negativas |
| Se observan de azul por el cristal violeta. | Se tiñen rosa por la safranila. |
| No perderán la coloración del azul violeta durante los pasos sucesivos. | Perderán la coloración inicial con los siguientes pasos. |
| Poseen una malla de peptidoglucano en su parte externa. | Se teñirán de rosa debido a la Safranina. |
| :) | Una fina capa de peptidoglucano y presentan una membrana externa. |
Reactivos y Colorantes
La tinción de Gram requiere cuatro soluciones:
· P r i m e r c o lo r a n t e: Un colorante básico (+) que en contacto con células cargadas negativamente, reacciona con ellas coloreándolas. El más utilizado es el cristal violeta. (1’)
· S o l u c i ó n M o r d i e n t e: Fija las tinciones y aumenta la afinidad entre el colorante y las células. Los mordientes usados suelen ser sales metálicas acidas bases, como por ejemplo, una solución diluida en yodo. (1’)
· A g e n t e D e c o lo r a n t e: Es un disolvente orgánico, por ejemplo alcohol acetona. (30 seg.)
· C o lo r a n t e D e C o n t r a s t e: Es un colorante básico de distinto color que el primer colorante, como por ejemplo, la Safranina. (1’)
Procedimiento técnico.
• Realizar el extendido de la muestra.
• Fijacion del extendido.
• Métodos físicos: acción del calor
• Métodos químicos: metanol
• Primer colorante: cristal violeta
• Mordiente: Lugol (sc I2/KI)
• Decoloración: mezcla alcohol-acetona 1:1
• Segundo colorante: safranina
Tinción de Ziehl-Neelsen
Variante histológica
· Ácido periódico 5%
- carbol fucsina de Ziehl (fucsina fenicada). Preparar mezclando en el orden dado:
- 0,5 g fucsina básica
- 50 cc agua destilada
- 5 cc etanol absoluto
- 2,5 g cristales de fenol derretidos
- hematoxilina
- alcohol ácido 1%:
- alcohol de 70º
- ácido clorhídrico
Procedimiento:
El procedimiento es el siguiente:
• desparafinar e hidratar los cortes
• ácido periódico 5%, 10 min
• lavar con agua destilada
• fucsina fenicada, 15 min
• decolorar en alcohol ácido al 1%
• lavar con agua destilada
• hematoxilina, 10 min
• azulidificar con, por ejemplo, carbonato de litio
• deshidratar, aclarar y montar preparaciones
Los cortes que se hacen en la piel para la variante histológica del procedimiento de ziehl neelsen solo los realiza los patólogos ya que se dedican al diagnóstico basado en la observación morfológica de lesiones en la piel provocadas por bacterias y hongos su área en la medicina diagnostican a través de los análisis propios del laboratorio clínico, e incluye Hematología analítica, Inmunología diagnóstica, Microbiología diagnóstica, Bioquímica o Química clínica, Citogenética y Genética Molecular. Expertos en entender cómo funciona en vida el cuerpo humano, los patólogos están igualmente bien informados en la descomposición gradual que tiene lugar una vez que la llama se ha extinguido. Realizando estos cortes la única tinción que se puede utilizar con los cortes es la tinción de ziehl neelsen que los reactivos que se utilizan ya que si se quiere investigas si son BAAR.
Variante clásica o "en caliente"
Ésta y la siguiente variantes son para preparaciones citológicas.
- Hacer un frotis de la muestra de esputo.
- Dejar el frotis sobre el puente de tinción.
- Aplicar fucsina-fenicada.
- Calentar con un mechero hasta la emisión de vapores (3-5 minutos).
- Decolorar con alcohol-ácido.
- Aplicar azul de metileno (1 minuto).
- Enjuagar con agua
En "frío"
- Hacer un frotis.
- Dejarlo en el puente de tinción.
- Aplicar fucsina-fenicada (solución con fenol y mayor concentración de fucsina).
- Dejar en vasos coplin durante 20 minutos.
- Decolorar con alcohol acido.
- Lavar con agua del grifo.
- Contrastar con azul de metileno
Algunos microorganismos ácido-alcohol resistentes
• Mycobacterium: fuertemente ácido-alcohol resistentes
• Nocardia y Actinomices: débilmente ácido-alcohol resistentes.
• Parásitos coccídeos (Cryptosporidium) de muestras [fecales].
Mycobacterium:
El género incluye patógenos que causan graves enfermedades en los mamíferos, incluyendo tuberculosis y lepra. El prefijo latino "myco—" significa tanto hongo como cera; su uso aquí se relaciona con los compuestos cerosos de la pared celular. Las micobacterias tienen forma de bacilos rectos o ligeramente curvados y miden 0,2-0,6 µm de ancho por 1,0-10 µm de largo. Las micobacterias son bacterias aerobias y no móviles (con excepción de la especie M. marinum, que ha mostrado ser móvil dentro de los macrófagos). Tienen acido-alcohol resistencia, no producen endosporas ni cápsulas y suelen considerarse Gram-positivas.
Micobacterium Marinum:
Esta mycobacteria solo se encuentra en acuarios, estanques, y aunque es poco frecuente la infección, solo humanos que tengan contacto con este tipo de lugares la adquieren.
Nocardia:
Es un género de bacterias Gram-positivas que se encuentran en suelos de todo el mundo ricos en materia orgánica. Son catalasa-positivas y con forma de bacilos filamentosos, parecen hilos alargados. Algunas especies son patogénicas causando nocardiosis. La mayoría de las infecciones causadas por Nocardia se adquieren por inhalación de la bacteria o a través de traumatismos.
Cryptosporidium:
Es un género de protistas parásitos del filo Apicomplexa al que se asocia con una enfermedad llamada criptosporidiosis diarreica en seres humanos. Otros apicomplejos patógenos incluyen Plasmodium, el parásito de la malaria, y Toxoplasma, el agente causante de la toxoplasmosis. El parásito se contrae por vía fecal-oral. Los ooquistes esporulados, conteniendo cuatro esporozo, son excretados por el huésped infectado a través de las heces y posiblemente otras rutas, tales como las secreciones respiratorias.
Corynebacterium:
Es un género de bacterias, bacilos y gram positivos, inmóviles, anaerobio facultativos, pertenecientes al filo actinobacteria. Es uno de los géneros más numerosos de actinobacterias con más de 50 especies, la mayoría no causa enfermedades, sino que son parte de la flora saprófita de la piel humana.
Fundamento
Este método se basa en que las paredes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (por ejemplo, el ácido micólico) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistencia|bacilos ácido-alcohol resistentes o BAAR. Las Mycobacterium|micobacterias como Mycobacterium tuberculosis|M. tuberculosis y Mycobacterium marinum|M. marinum y los parásitos cocoLa coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras.
OTRAS TINCIONES
TINCION DE ESPORAS
Algunas bacterias son capaces de desarrollar formas de resistencia denominadas esporas como mecanismo de defensa a agresiones ambientales. Son estructuras de pared gruesa en las que el microorganismo logra soportar las condiciones desfavorables de calor, desecación, acidez, etc. Cuando las condiciones ambientales vuelven a ser favorables las esporas "germinan" y vuelven a generarse formas vegetativas. Sólo algunas bacterias son capaces de formar esporas y esta característica puede en algunos casos orientar el diagnóstico. Están descritos varios métodos para teñir esporas. Quizás el más utilizado sea el de Wirtz-Conklin o tinción con verde malaquita. Este colorante se une fuertemente a las esporas gracias a la utilización de calor como mordiente. La fase de decoloración en este caso se realiza con agua abundante. Las formas vegetativas pierden el color verde y se tiñen con el colorante de contraste (fucsina o safranina).
TINCION DE VERDE MALAQUITA (Wirtz-Conklin)
El verde de malaquita es un colorante verde activo frente a una gran variedad de parásitos externos y agentes patógenos como hongos, bacterias, etc. Su principal aplicación es para el tratamiento contra parásitos protozoos de agua dulce. Algunos géneros bacterianos, entre los que destacan Clostridium y Bacillus, producen en su interior formas de resistencia denominadas endosporas. Se producen cuando las condiciones ambientales son desfavorables (agotamiento de los nutrientes, temperaturas extremas, radiaciones, compuestos tóxicos, etc.) formándose una espora por cada forma vegetativa.
Tinción negativa de cápsulas
Algunas bacterias presentan una capa externa a la pared denominada cápsula. Está compuesta de azúcares y proteínas. No es una estructura vital para la bacteria, de modo que es posible que bajo determinadas condiciones ambientales o del propio desarrollo genere cápsula y bajo otras no lo haga. Se ha comprobado que la presencia de cápsula dificulta de algún modo la fagocitosis de las bacterias, es decir las cápsulas constituyen un factor de virulencia de los microorganismos.
La detección de cápsulas en las bacterias también puede orientarnos en el diagnóstico de laboratorio, y es especialmente importante en el diagnóstico de meningitis producida por Cryptococcus neoformans.. Se trata de una levadura que provoca graves cuadros de meningitis en personas inmunocomprometidas, y su detección en LCR lo más precozmente posible es vital para la supervivencia del paciente.
Conclusión
Las tinciones diferenciales son importantes y útiles ya que se realiza un proceso de fácil manejo con estas tinciones se observa cómo cambia la coloración de la pared celular de una bacteria pero dependiendo ya que cada bacteria se puede realizar con diferentes tinciones.
Bibliografías
http://www.slideshare.net/josemagarinos/tinciones-diferenciales-aspectos-tecnicos
http://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Gram
http://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Ziehl_Neelsen
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